1 Кровь
Показания к проведению исследования:
клиническая картина сепсиса; лихорадочные состояния неустановленной этиологии;
пневмонии; подозрение на инфекционные заболевания: брюшной тиф и паратифы,
сальмонеллезы, бруцеллез, возвратный тиф, лептоспирозы, малярия, эпидемический
менингит, пневмококковые инфекции, пищевые токсикоинфекции (при наличии
лихорадки), стафилококковые и стрептококковые инфекции, сибирская язва,
туляремия, чума.
Количество независимо отбираемых проб
крови и время их взятия определяется лечащим врачом (табл. 1). Как правило,
должны исследоваться не менее 2—3 проб крови, каждая из которых взята путем
отдельной венепункции. Это необходимо для дифференциации истинной бактериемии
от случайной контаминации крови при венепункции. Вероятность загрязнения
вследствие случайного прокола сальной или потовой железы составляет 3%.
Таблица 1. Рекомендуемое число отбираемых проб
крови в зависимости от клинической ситуации
Клиническое состояние | Кол-во проб | Примечание |
Острый сепсис, менингит, менингококоцемия, остеомиелит, | 2 | из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда |
Лихорадка неясного генеза | 4 | сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов (двух |
Эндокардит, вялотекущий сепсис: в период обострения при подостром или вялотекущем течении | 2 — 3(6) | из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда |
Эндокардиты у пациентов: получающих антибактериальную терапию на фоне | 6 | по 2 отдельные пробы в течение трех дней в течение 48 ч |
У больных, получающих
антибактериальные препараты, пробы необходимо собирать непосредственно перед введением
следующей дозы препарата. При наличии лихорадки оптимальным является взятие
крови на фоне повышения температуры тела (но не на пике температуры!).
Необходимое оснащение.
1.
Шприцы
одноразовые 20-граммовые (для детей 10-граммовые) с иглами для венепункции. Запрещается
использовать шприцы со «стерильного стола» в перевязочной, проверять
проходимость иглы, просасывая через нее воздух.
2.
Флаконы с
питательными средами: среда для аэробов и факультативных анаэробов среда для
облигатных анаэробов (например, двойная среда среда СКС) или универсальная
среда для аэробов и анаэробов. Предпочтительно использовать промышленно
произведенные среды, разрешенные к применению.
При использовании изготовленной
в лаборатории среды СКС в качестве индикатора анаэробиоза в нее добавляют
резазурин, который краснеет в присутствии кислорода. В случае покраснения более
20% верхней части столбика среду регенерируют прогреванием в течение 20 минут в
кипящей водяной бане.
3.
70° этиловый
спирт.
4.
2% или 5% настойка
йода.
5.
Венозный жгут.
6.
Резиновые
(латексные, виниловые) перчатки.
7.
Спиртовка (только
при использовании флаконов со средами, изготовленными в лаборатории).
Взятие исследуемого материала.
Манипуляции проводят с соблюдением
правил асептики. Кровь берут у постели больного или в перевязочной
(процедурной) и тут же засевают на питательные среды. Рекомендуется
осуществлять эти процедуры вдвоем. Один медицинский работник проводит обработку
кожи больного, венепункцию и взятие крови, второй, в это время открывает над
пламенем спиртовки пробки флаконов со средами, подставляет их под струю крови
из шприца, обжигает горлышки флаконов и закрывает их.
Кровь для исследования получают путем
венепункции.
Порядок обработки кожи и взятия крови
следующий:
1.
кожу над
пунктируемой веной обрабатывают 70° спиртом;
2.
наносят 2-5%
йодную настойку, круговыми движениями, начиная от центра, в течение 30 сек.;
3.
после высыхания
йодной настойки проводят венепункцию;
4.
пальпировать
сосуд в районе введения иглы после обработки кожи нельзя;
5.
протирают кожу
70° спиртом.
У взрослых кровь берут в объеме 10-20
мл, у детей — в зависимости от возраста.
Сразу после взятия кровь засевают на
питательные среды. Соотношение крови и среды должно быть 1/10—1/60 для
устранения бактерицидного действия крови путем ее разведения. Техника посева
зависит от вида используемых питательных сред.
При использовании сред лабораторного
приготовления, расфасованных во флаконы с целлюлозными (ватными) пробками,
посев проводят следующим образом:
·
снимают иглу со
шприца;
·
над пламенем
спиртовки открывают флакон;
·
вносят половину
крови из шприца во флакон;
·
обжигают горлышко
и пробку флакона в пламени спиртовки;
·
закрывают флакон
пробкой;
·
осторожно, чтобы
не замочить пробку, перемешивают содержимое флакона круговыми движениями;
·
вторую порцию
крови из шприца вносят во второй флакон, повторяя указанные операции.
При использовании флаконов со средами
промышленного изготовления во флаконах с резиновыми либо пластиковыми пробками:
·
при наличии на
флаконах защитных колпачков их удаляют (отгибают), не открывая при этом пробки;
·
пробки флаконов
обрабатывают 70% этиловым спиртом (использование йодной настойки определяется
рекомендациями производителя сред);
Для приготовления мазка каплю крови
диаметром 2—3 мм наносят на обезжиренное предметное стекло вблизи от торца.
Перед каплей крови ставят под углом 45° одноразовый пластиковый шпатель для
растяжки мазков или стекло со шлифованным краем и плавным движением равномерно
распределяют материал по поверхности.
Для приготовления препарата «толстая
капля» на стекло наносят каплю крови диаметром около 5 мм и распределяют ее с
помощью иглы или пипетки в диск диаметром 10—15 мм. Толщина капли должна
позволять видеть через нее газетный шрифт. Иногда мазок и препарат «толстая»
капля готовят на одном стекле.
Препараты высушивают («толстая капля»
сохнет 2—3 часа) и доставляют в лабораторию в специальном планшете для хранения
и транспортировки стекол с соблюдением необходимой осторожности. Посевы крови
немедленно доставляют в лабораторию, оберегая от охлаждения.
Бактериологическая лаборатория при
исследовании посевов крови выдает отрицательный ответ в случае, если рост
микроорганизмов не обнаружен в течение 10 дней инкубации. В случае наличия у
больного подозрения на внутрисосудистую инфекцию или бруцеллез возникает
необходимость пролонгированной (до 1 месяца) инкубации посевов. Это должно быть
особо отмечено в направлении. Рутинный посев крови не обеспечивает выявления
ряда микроорганизмов.
Му 4.2.2039-05 техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории —
МУ 4.2.2039-05
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
Дата введения 2006-07-01
1. РАЗРАБОТАНЫ: МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского (К.И.Савицкая, Е.Е.Круглов); Главным бактериологом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (В.В.Кутырев); Центральным научно-исследовательским институтом эпидемиологии (Н.А.Семина, В.В.Галкин); ФГУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора (Е.Н.Беляев, И.В.Брагина, Н.С.Кривопалова); Научно-исследовательским институтом антимикробной химиотерапии Смоленской государственной медицинской академии (Л.С.Страчунский, Р.С.Козлов); Научно-исследовательским институтом вирусологии им. Д.И.Ивановского (Л.В.Урываев); Институтом медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского ММА им. И.М.Сеченова (В.П.Сергиев, М.Н.Лебедева); Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (З.С.Середа).
2. РЕКОМЕНДОВАНЫ К УТВЕРЖДЕНИЮ Комиссией по государственному санитарно-гигиеническому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 6 октября 2005 г. (протокол N 3).
3. УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 23 декабря 2005 г.
4. ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ с 1 июля 2006 г.
5. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.
1.1. В методических указаниях изложены правила сбора и транспортирования биологических материалов в микробиологические лаборатории в целях повышения качества результатов лабораторных исследований и организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, а также профилактики внутрибольничных инфекций у медицинского персонала и пациентов.
1.2. Методические указания предназначены для использования органами и организациями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут использоваться органами и организациями здравоохранения.
2.1. Получение достоверных данных о выявлении источников заражения необходимо для своевременной и эффективной организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, оценки уровня пораженности населения при проведении эпидемиологического надзора.
2.2. Разработанная техника сбора и транспортирования биологических материалов в микробиологические лаборатории позволит снизить уровень преаналитической ошибки и повысить качество работы лабораторий по объективизации результатов.
2.3. Методические указания определяют правила предохранения медицинского персонала и пациентов от инфицирования при сборе и доставке в лаборатории проб биоматериалов, которые могут быть обсеменены бактериями, грибами, вирусами, паразитами.
2.4. Методические указания могут применяться при проведении эпидемиологического надзора за антимикробной резистентностью выделенных и идентифицированных в лаборатории возбудителей инфекции, оптимизации применения антимикробных препаратов и мероприятий в области профилактики, контроля и сдерживания резистентности на локальном, региональном и национальном уровнях.
3.1. Для предохранения от инфицирования медицинского персонала и пациентов при сборе проб биоматериалов и доставке его в лабораторию необходимо:
не загрязнять наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб;
не загрязнять сопроводительные документы (направления);
свести к минимуму непосредственный контакт пробы биоматериала с руками медицинского работника, собирающего и доставляющего его в лабораторию;
использовать стерильные одноразовые или разрешенные к применению для этих целей в установленном порядке контейнеры (емкости) для сбора, хранения и доставки проб;
транспортировать пробы в переносках или укладках с раздельными гнездами;
соблюдать асептические условия для предотвращения инфицирования пациента в процессе выполнения инвазивных мероприятий;
собирать пробы в стерильную одноразовую или стеклянную посуду (не загрязненную биоматериалом, не испорченную трещинами, отколотыми краями и другими дефектами)
.
3.2. Пробы биоматериала необходимо собирать следующим образом:
до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности — непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;
в количестве (вес, объем), необходимом для выполнения анализа, т.к. недостаточное для исследования количество биоматериала приводит к получению ложных результатов;
с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой, т.к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке результатов, полученных, например, при исследовании мокроты, проб из носа, глотки (зева), гениталий и др.
3.3. При сборе пробы следят за тем, чтобы в лаборатории при вскрытии емкости с биоматериалом не образовывался аэрозоль: пробы крови и других жидкостей организма аккуратно без образования пены переносят из шприца в сухую и/или наполненную средой (антикоагулянтом) посуду.
3.4. В направлении на исследование указывают: фамилию, имя, отчество больного; год рождения; отделение, в котором он находится; номер истории болезни (амбулаторной карты); диагноз; материал, посылаемый на исследование, и задачи исследования; дату и время взятия материала (часы); антибактериальные (иммунные) препараты, если проба сдается на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта), направляющего пробу на исследование. При направлении биоматериалов, полученных при вскрытии, указывают также отделение, в котором умер больной.
3.5. Перед сбором пробы, особенно при применении инвазивных методов, учитывается вероятность риска для пациента и пользы, а также значимость именно данного вида биоматериала для целей объективизации клинического диагноза и оценки проводимых или планируемых лечебных мероприятий.
4.1. Все собранные пробы отправляют в микробиологическую лабораторию немедленно после получения, за исключением случаев использования емкостей с транспортировочными средами, разрешенными к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке.
Это необходимо для:
сохранения жизнеспособности возбудителей и возможности выделения микроорганизмов, требующих особых условий культивирования (Haemophylus и др.);
предотвращения избыточного роста быстрорастущих и активных микроорганизмов;
поддержания соотношения исходных концентраций изолятов при наличии в пробе микробных ассоциаций;
сокращения времени контакта пробы с некоторыми антисептиками, используемыми местно, которые могут обладать антибактериальной активностью;
объективизации клинического диагноза инфекционно-воспалительного заболевания и оценки результатов терапии.
4.2. Допускается использование альтернативных методов для увеличения сроков доставки биоматериала в лабораторию.
Пробы хранят в холодильнике при температуре 2-8 °С, за исключением нижеперечисленных случаев.
4.2.1. Когда пробу хранят в специализированной транспортировочной емкости (транспортировочная система), разрешенной к применению в установленном порядке, представляющей собой стерильную одноразовую пробирку с агаризованной или жидкой транспортировочной средой и зондом-тампоном, вмонтированным в пробку и стерильно упакованным вместе с пробиркой. В таких емкостях пробы хранят при комнатной температуре (18-20 °С). Транспортировочные среды, специальные плотные с активированным углем и без него, позволяют обеспечить сохранение жизнеспособности микроорганизмов, требующих особых условий культивирования, в течение 48-72 ч.
Для проб на анаэробы и для фекальной флоры используют специальные емкости с транспортировочной средой, пробирки со средами для выделения кампилобактерий и хеликобактера, разрешенные к применению в установленном порядке. Такие среды создают анабиотическую атмосферу для микроорганизмов, что способствует снижению их метаболизма, сдерживанию роста, препятствует их высыханию и накоплению продуктов жизнедеятельности.
Каждую пробу, собранную в жидкую среду, тщательно перемешивают со средой.
4.2.2. Когда кровь культивируют в бульоне, тогда после получения пробу хранят в термостате при температуре 35-37 °С.
Если пробы собирают в специальные емкости для последующего исследования с двухфазной средой, их следует хранить при комнатной температуре (18-20 °С).
4.2.3. Когда при возможном наличии температурозависимых микроорганизмов (Neisseria sp.) пробы оставляют при комнатной температуре (18-20 °С).
4.2.4. Когда пробу хранят в емкостях с соответствующими питательными средами, подготовленных в лаборатории или разрешенных к применению в установленном порядке при проведении:
бактериологических исследований — в пробирках с вмонтированными зондами-тампонами или без них со средой, состоящей из забуференного физиологического раствора с глицерином для определения энтеробактерий семейства Кишечных («на дизгруппу») и аэромонад. При работе с тампонами, вмонтированными в ватно-марлевую пробку, следят за тем, чтобы не замочить (не загрязнить) пробку средой и/или собранным материалом. Собранную пробу тщательно перемешивают со средой. Используют также готовые пробирки со специальной плотной средой, разрешенные к применению в установленном порядке;
вирусологических исследований — в специальных емкостях с жидкой средой, разрешенных к применению в установленном порядке;
паразитологических исследований — пробу тщательно смешивают с консервантом.
Пробы ликвора хранят при комнатной температуре (18-20 °С), а при проведении в лаборатории вирусологических исследований — в термостате при 35-37 °С.
4.3. Для транспортирования проб, исследуемых на наличие аэробов и факультативных анаэробов, используют:
одноразовые стерильные сухие пробирки с вмонтированным зондом-тампоном (тубсеры) или емкости с транспортировочной средой, разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке; допускается использование стерильных стеклянных пробирок, укупоренных газопроницаемой пробкой с вмонтированным зондом-тампоном, приготовленных в лаборатории;
одноразовые стерильные емкости с завинчивающейся крышкой (допускаются стеклянные с газопроницаемой пробкой) — для сбора проб мочи, мокроты, фекалий, бронхо-альвеолярного лаважа, биопсийного (кусочки ткани) материала;
стерильные одноразовые с завинчивающейся пробкой или стеклянные пробирки — для сбора стерильных жидкостей, бронхо-альвеолярного лаважа, отделяемого из дренажей или соскобов;
стерильные чашки Петри — для сбора проб волос или для транспортирования соскобов с маркировкой дна чашки;
специальные стерильные носоглоточные и урогенитальные зонды-тампоны с осью из алюминия (диаметр оси — 0,9 мм) и маленьким тампоном из хлопка или вискозы на кончике (диаметр тампона — 2,5 мм), вмонтированным в пробку, укупоривающую стерильную одноразовую стеклянную пробирку — для проб из носоглотки на В. pertusis и из уретры у мужчин.
4.4. Для транспортирования проб, исследуемых на наличие анаэробов, используют емкости со специальными транспортировочными средами и пробирки с тиогликолевой средой; пробирки со средами для выделения кампилобактерий и хеликобактера, разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке. Пробу, собранную в жидкую среду, тщательно с ней перемешивают. Для получения проб рекомендуются следующие приемы:
отделяемое дренажей, используемых для активной аспирации полостей, отсасывают стерильным шприцем с плотным поршнем в объеме 2-4 мл; на заполненный шприц надевают стерильную иглу, закрытую стерильным ватным тампоном, удаляют из шприца избыток воздуха; ватный тампон сбрасывают в дезинфицирующий раствор; конец иглы вкалывают в стерильную резиновую пробку и в таком виде шприц с материалом доставляют в лабораторию;
содержимое очагов инфекции и полостей, получаемое путем их пунктирования, собирают в объеме 2-4 мл с помощью 2-, 5-, 10-миллилитровых шприцев с плотным поршнем; из шприца удаляют избыток воздуха, закрыв иглу стерильным ватным тампоном, который затем сбрасывают в дезинфицирующий раствор; иглу дезинфицируют протиранием тампоном, смоченным 70%-м этиловым спиртом; для герметизации конец иглы вкалывают в стерильную резиновую пробку и в таком виде шприц с материалом доставляют в лабораторию.
При сборе большого объема материала (3 мл и более) анаэробные бактерии могут оставаться жизнеспособными в течение 24 ч при комнатной температуре (18-20 °С).
Если отделяемого всего несколько капель, его переносят из шприца в небольшую емкость или в пробирку с транспортировочной средой немедленно после получения (емкости с транспортировочными средами накануне получают в лаборатории).
Кусочки тканей (биопсийный материал) при подозрении на анаэробную инфекцию собирают в стерильные одноразовые емкости с завинчивающейся крышкой (допускается — в стеклянную посуду с притертой крышкой) и доставляют в лабораторию немедленно.
4.5. Для транспортирования проб, исследуемых на наличие вирусов, используют специальные емкости с жидкой средой для сохранения вирусов.
Таблица 1
Посуда, используемая для доставки проб в лабораторию
Источник и вид клинического материала | Изделия, используемые для доставки пробы |
1 | 2 |
Кровь | Специальные транспортировочные емкости со средой, с нейтрализаторами антибиотиков и реагентами, разрушающими форменные элементы крови, или без них, разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке; двухфазная среда во флаконах |
Центральная нервная система | |
Ликвор | Стерильные одноразовые пробирки с завинчивающейся пробкой; стерильные стеклянные пробирки с целлюлозной или ватно-марлевой пробкой |
Материал при абсцессах мозга и биопсийный материал при воспалительных процессах в центральной нервной системе | Шприц с иглой, воткнутой в стерильную резиновую пробку; пробирка с тиогликолевой средой, закрытая стерильной резиновой пробкой; транспортировочные емкости со средой для сохранения анаэробов |
Нижние дыхательные пути | |
Биопсийный материал легких и трахеи; мокрота, естественно откашливаемая и индуцированная; соскоб с бронхов | Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой (для сбора мокроты); подготовленная в лаборатории стерильная стеклянная емкость |
Аспират трахеи, бронхо-альвеолярный лаваж, смывы с бронхов | Стерильная одноразовая емкость для сбора мокроты с завинчивающейся крышкой; плотно закрывающаяся стерильная стеклянная пробирка |
Аспират транстрахеальный и легких | Специальные транспортировочные емкости со средой для анаэробов; шприц с иглой, воткнутой в стерильную резиновую пробку; емкость с тиогликолевой средой; стерильная одноразовая пластиковая емкость с завинчивающейся крышкой; плотно закрывающаяся пробирка |
Верхние дыхательные пути | |
Мазки из носа, зева, носоглотки, наружного уха | Стерильный одноразовый зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер), или транспортировочная емкость с соответствующей средой; транспортировочный сосуд для вирусов; стерильная стеклянная посуда, смонтированная в лаборатории |
Назальный смыв, назофагальный аспират | Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; транспортировочный сосуд для вирусов |
Жидкость, получаемая при тимпаноцентезе, аспират синуса, получаемые при аспирации иглой | Шприц с иглой, обеззараженной после проведения манипуляции с помощью тампона, смоченного 70%-м этиловым спиртом, и воткнутой в стерильную резиновую пробку; можно перенести материал из шприца в стерильную одноразовую или стеклянную пробирки или специальный сосуд со средой для транспортирования анаэробов |
Ткань, получаемая во время операции носа, глотки, уха | Стерильный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой; пробирка с тиогликолевой или другой транспортировочной средой, плотно закрытая стерильной резиновой пробкой; плотно закрытая стерильная одноразовая пластиковая или стеклянная пробирка |
Глаза | |
Соскобы с конъюнктивы уголка глаза | Мазки на стерильных обезжиренных предметных стеклах; материал, который отбирают в специальный транспортировочный контейнер со средой или засевают в питательную среду |
Интраокулярная жидкость | Мазки на стерильных обезжиренных предметных стеклах; материал, который отбирают в специальный транспортировочный контейнер со средой для анаэробов или шприц с предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом иглой, воткнутой в стерильную резиновую пробку |
Отделяемое, взятое стерильной стеклянной палочкой или стерильным ватным зондом-тампоном со слизистой оболочки нижней переходной складки, с края век, при язве — с роговицы (после обезболивания), при уголковом конъюнктивите — с уголков век | Стерильная одноразовая или стеклянная пробирка с сахарным бульоном, в которую вмонтирован зонд-тампон, или стерильная стеклянная палочка, используемые для взятия пробы; специальный транспортировочный контейнер со средой для вирусов |
Секрет из слезного мешка | Одноразовый стерильный зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер), или в стеклянную пробирку |
Мочеполовая система | |
Моча | |
Средняя порция свободно истекающей мочи; из канала подвздошной кишки, использованного для создания искусственного мочевого пузыря; из катетера у реанимационных больных. Смыв из мочевого пузыря. Проба, полученная при билатеральной уретральной катетеризации | Стерильная одноразовая емкость для сбора мочи с завинчивающейся крышкой или стерильная одноразовая пробирка с крышкой; или специальная одноразовая пробирка для сбора мочи. При использовании стерильной стеклянной пробирки с целлюлозной или ватно-марлевой пробкой следят за тем, чтобы не замочить пробку материалом (объем пробы 10-20 мл) |
Проба, полученная при проведении надлобковой аспирации | Стерильный шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; стерильный шприц с иглой, предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом и воткнутой в резиновую пробку |
Материал из женских половых органов | |
Жидкости: амниотическая, фаллопиевых труб, бартолиновая | Специальная транспортировочная емкость со средой для анаэробов; шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; шприц с иглой, обработанной 70%-м спиртом и воткнутой в стерильную резиновую пробку (объем пробы 1-2 мл) |
Пробы из цервикального канала, уретры, влагалища | Одноразовый стерильный зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер) или емкость транспортировочная со специальной средой; зонд-тампон, вмонтированный в целлюлозную или ватно-марлевую пробку стерильной стеклянной пробирки. Предметное стекло с приготовленным мазком для исследования бактериальных инфекций, передаваемых половым путем, и вирусов. Пробирка с транспортировочной средой с активированным углем для сохранения гонококков в течение 48 ч и более |
Пробы материала из эндометрия | Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой или пробирка, или емкость транспортировочная со средой для анаэробов; стерильная стеклянная посуда |
Материал наружных половых органов | Стерильный шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; предметное стекло с мазком, закрытым покровным стеклом для определения Т. pallidum; зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер) или стеклянную пробирку; специальная транспортировочная пробирка со средой с активированным углем для сохранения гонококков и транспортировочные емкости для вирусов и хламидий; мазки на предметных стеклах для обнаружения других возбудителей инфекций, передаваемых половым путем |
Материал из мужских половых органов | |
Мазки из уретры | Зонд-тампон на алюминиевой оси (уретральный зонд-тампон), вмонтированный в стерильные одноразовую (тубсер) или стеклянную пробирки; специальная транспортировочная пробирка со средой с активированным углем для сохранения гонококков и транспортировочные сосуды для вирусов и хламидий; мазки на предметных стеклах для обнаружения других возбудителей инфекций, передаваемых половым путем |
Эякулят, сперма | Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; стерильные пробирка или тубсер, одноразовые или стеклянные |
Материал придатков яичка при эпидидимите | Специальный транспортировочный контейнер со средой для анаэробов или емкость с тиогликолевой средой; стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой или стерильная стеклянная пробирка с целлюлозной или ватно-марлевой пробкой |
Поражение пениса | Шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; предметное стекло с мазком на Т. pallidum, покрытое покровным стеклом; зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер) или стеклянную пробирку; транспортировочные контейнеры для вирусов и хламидий; мазки для обнаружения других возбудителей инфекций, передаваемых половым путем |
Материал при подозрении на наличие гонореи | |
Мазки из ануса, цервикального канала, уретры, влагалища | Зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер) или стеклянную пробирку; специальная транспортировочная пробирка со средой с активированным углем для сохранения гонококков в течение 48 ч и более |
Желудочно-кишечный тракт | |
Полость рта | Зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер) или стеклянную пробирку; стерильная одноразовая или стеклянная емкость для сбора смыва из ротовой полости |
Желудочный лаваж или промывная жидкость; дуоденальный аспират; проба, получаемая при ректороманоскопии; ректальный биопсийный материал | Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; специальный стерильный контейнер для сбора мокроты; стерильная стеклянная емкость; аспират — в стерильном шприце с иглой, предварительно обеззараженной и воткнутой в стерильную резиновую пробку |
Ректальный мазок | Одноразовый стерильный зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер); или стерильная пробирка со специальной транспортировочной средой; зонд-тампон из нержавеющего материала, вмонтированный в целлюлозную или ватно-марлевую пробку стерильной стеклянной пробирки |
Фекалии на наличие кишечных инфекций («дизгруппа»), хеликобактера, кампилобактера | Стерильная пробирка с тампоном в физиологическом растворе с глицерином; контейнер транспортировочный со средой для анаэробов в фекальных образцах, со специальными средами с активированным углем и без него для выделения Campylobacter sp. и Helicobacter sp.; зонд-тампон в сухой стерильной одноразовой пробирке (тубсер); стерильная стеклянная пробирка, смонтированная с зондом-тампоном на металлической проволоке из титана, стали, алюминия. Не допускается использование тампона с деревянной осью |
Фекалии на наличие дисбактериоза по родовому и видовому составу микробов («на флору») | Специальный транспортировочный контейнер со средой для анаэробов в фекальных образцах, со специальными средами с активированным углем и без него для выделения Campylobacter sp. и Helicobacter sp., разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке; зонд-тампон в пробирке с физиологическим раствором с глицерином в стерильной одноразовой или стеклянной пробирке; специальный одноразовый стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой; стеклянная, смонтированная в лаборатории емкость |
Фекалии на наличие дисбактериоза с количественным учетом выделенных иидентифицированных микробов («на дисбактериоз») | Специальные стерильные одноразовые контейнеры с завинчивающейся крышкой и лопаточкой для сбора материала и отбора пробы для посева, имеющие стандартный вес; смонтированная в лаборатории специальная стерильная стеклянная емкость |
Кожа и подкожные ткани | |
Язвы, узелки (узелковые утолщения), неглубокие, поверхностные раны (гнойные; ожоги); глубокие раны или абсцессы, кости | Специальные стерильные одноразовые контейнеры с завинчивающейся крышкой; стерильные пробирки с пробками одноразовые или стеклянные объемом 5 мл; емкости со специальными средами для анаэробов |
Экссудат подкожной и мягких тканей; аспират мягких тканей | Стерильный шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; шприц с иглой, предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом и воткнутой в резиновую пробку |
Стерильные жидкости организма, за исключением крови, ликвора, мочи (см. выше) | |
Жидкости | |
Плевральная, перитонеальная, асцитическая, суставная, синовиальная | Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; закрытый шприц без иглы или с иглой, предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом и воткнутой в стерильную резиновую пробку |
Биоматериал для ПЦР-диагностики | |
Кровь; другие жидкости организма | Стерильные одноразовые пробирки с пробкой объемом 1,5 мл с антикоагулянтом. Пробирку переворачивают 3-5 раз для смешивания пробы с антикоагулянтом. Доставка в лабораторию — в штативе из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Биопсийный материал; соскобы; мокрота и другие виды биоматериала | Стерильные сухие одноразовые пробирки типа «Эппендорф» и другие аналогичные. Доставка в лабораторию — в специальном штативе из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Пробы среды, окружающей больного | |
Воздух | Стерильные чашки Петри одноразовые (=90 мм) или стеклянные (=100 мм) с плотными питательными средами. Доставка в лабораторию в специальных контейнерах-переносках |
Смывы с объектов среды, окружающей больного | Стерильные зонды-тампоны, вмонтированные в прозрачные пробирки с прозрачной бесцветной жидкой средой. Пробы доставляют в лабораторию в штативах из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Пробы для определения стерильности | |
Кровь и компоненты крови из отделения, занимающегося их заготовкой | Емкости с заготовленным материалом доставляют в лабораторию в специальных контейнерах-переносках |
Смывы с медицинского инструментария, шлангов аппаратуры, используемой в реанимационных и анестезиологических отделениях, а также в операционных; рук медицинского персонала; белья | Стерильные зонды-тампоны, вмонтированные в прозрачные пробирки с прозрачной бесцветной жидкой средой. Пробы доставляют в лабораторию в штативах из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Хирургический материал: тампоны, салфетки, турунды, ватные тампоны на деревянной оси | Стерильные прозрачные пробирки с пробками, с прозрачной бесцветной жидкой средой с 3-5 стерильными стеклянными бусинками. Пробы доставляют в лабораторию в штативах из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Шовный материал: кетгут, хранящийся в операционной в спиртовом растворе йода | Стерильная пробирка (флакон с пробкой) с раствором нейтрализатора (гипосульфит натрия) |
Шелк, капрон, мономерные синтетические нити, хранящиеся в операционной в спиртовом растворе | Стерильная пробирка с пробкой со стерильной дистиллированной водой в качестве смывной жидкости. Пробы шовного материала доставляют в лабораторию в штативах, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Смывы с операционного поля больного | До обработки поля: в прозрачные пробирки, наполненные прозрачной жидкой питательной средой. После обработки поля: стерильная пробирка (флакон с пробкой) с раствором нейтрализатора (гипосульфит натрия). Доставку материала в лабораторию осуществляют в штативах, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Пробы для определения иммунологических факторов системы антиинфекционной защиты | |
Кровь и другие жидкости организма для определения гуморальных факторов защиты | Одноразовые шприцы-пробирки (вакутайнеры); стерильные одноразовые пробирки с завинчивающейся пробкой; стерильные стеклянные пробирки со стерильными резиновыми, целлюлозными или ватно-марлевыми пробками. Пробы доставляют в лабораторию в специальном штативе из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве. При использовании стеклянных пробирок с ватно-марлевыми пробками — не замочить их при транспортировании |
Кровь и другие жидкости организма для определения клеточных факторов защиты | Стерильные одноразовые пробирки с завинчивающейся пробкой; стерильные стеклянные пробирки, плотно закрытые стерильной резиновой пробкой. Пробирки одноразовые с антикоагулянтом, подлежащие центрифугированию. Доставку в лабораторию осуществляют в специальном штативе из материалов, подлежащих стерилизации в автоклаве |
Мазки для определения бактериальных и вирусных антигенов (например, при подозрении на наличие инфекций, передаваемых половым путем) | Стерильное обезжиренное предметное стекло; для Т. pallidum — предметное стекло должно быть покрыто покровным стеклом. Доставку в лабораторию осуществляют в одноразовом контейнере или стерильных одноразовых или стеклянных чашках Петри в специальных контейнерах |
Правила по сбору, доставке и хранению различных проб биоматериала для микробиологического исследования
Кровь
Спинномозговая жидкость (ликвор)
Пробы при инфекционно-воспалительных процессах глаз
Пробы при инфекционно-воспалительных процессах уха
Пробы при инфекционно-воспалительных процессах дыхательных путей
Проба из носа
Проба из зева
Проба из носоглотки
Проба из ротоглотки
Пунктаты околоносовых пазух
Мокрота
Бронхоальвеолярный лаваж
Пробы при инфекционно-воспалительных процессах мочеполовой системы
Моча
Пробы из урогенитального тракта
Пробы при инфекционно-воспалительных процессах желудочно-кишечного тракта
Плевральная, перикардиальная, синовиальная жидкости и др.
Пробы при инфекциях кожи и подкожной клетчатки (поверхностные раны)
Пробы из инфицированных глубоких ран, абсцессов, мягких тканей
Пробы при инфекциях в стоматологии
Пробы при инфекционно-воспалительных процессах костей и суставов
Пробы для определения обсемененности сосудистого катетера при подозрении на катетер-ассоциированную инфекцию
Пробы материала при аутопсии
Пробы биоматериала для определения наличия анаэробов
Общие требования к сбору, хранению и доставке проб биоматериала для ПЦР-диагностики
Общие требования к сбору биоматериала для ПЦР-диагностики
Общие требования к условиям хранения проб биоматериала до доставки в лабораторию
Общие требования к доставке проб биоматериала для ПЦР-диагностики
Правила по сбору, доставке и хранению различных проб биоматериала для ПЦР-диагностики
Пробы фекалий для диагностики возбудителей кишечных инфекций
Пробы из носоглотки и ротоглотки для диагностики возбудителей коклюша, паракоклюша, бронхисептикоза
Пробы из носа на обнаружение Staphylococcus aureus, в т.ч. MRSA
Инструкция по использованию ESwab – универсальной системы для сбора биопроб с жидкой транспортной средой (Приложение 1)
Правила сбора материала для анализов
Забор крови с 8-00 до 12-00, с 13-00 до 16-00 в 120 каб.
Желательно сдавать кровь строго натощак.
Кровь на иммунограмму, биохимию, общий анализ можно сдавать через 2-3 часа после еды,
кровь на ИФА можно сдавать после легкой еды.
Кабинет 120.
Общий анализ мочи, анализ мочи по Нечипоренко
Моча собирается в чистую сухую посуду после тщательного туалета наружных половых органов. Для общего анализа мочи лучше использовать первую утреннюю порцию мочи, выделенную после сна, в количестве 100 мл. Для анализа мочи по Нечипоренко – среднюю порцию утренней мочи в количестве 10 мл.
Прием анализа: пн.-пт. 8:00-12:00; 13:00-16:00; в кабинете 123
Соскоб на энтеробиоз
Необходимо заранее взять в лаборатории (кабинет 123) предметное стекло с наклеенной липкой лентой, внимательно выслушать инструкции лаборанта по забору анализа, дома (следуя инструкции) наклеить липкую ленту на перианальную область, снять, наклеить на предметное стекло, не порвав ее.
Прием анализа: пн.-пт. 8:00-12:00; 13:00-16:00, в кабинете 123
Анализ кала на яйца глистов, цисты лямблий, антиген лямблий
Собрать кал в чистую сухую пластиковую или стеклянную банку. Если собран вечерний кал, то до доставки в лабораторию поместить образец в холодильник. Анализ готовится 2 рабочих дня
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 (до 14:00 на антиген лямблий), в кабинете 123
Исследование кала на «скрытую кровь»
Собрать кал в чистую сухую пластиковую или стеклянную банку.
До сдачи анализа исключают из пищи в течение 3-4 дней мясо, рыбу, все виды зеленых овощей, а также помидоры и яйца. Сдают на анализ утренний кал в чистой сухой посуде.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00, в кабинете 123
Бактериологическое исследование кала
(на дисбактериоз, на кишечную группу бактерий)
Желательно собрать утренний кал в специальную стерильную посуду (если невозможно, вечерний кал хранить в холодильнике, доставить в лабораторию к 8.00): положить в специальную стерильную баночку стерильной лопаточкой примерно с половину чайной ложечки, с самой верхней части испражнений, не касаясь других предметов. Баночку закрыть и доставить в лабораторию в течение двух часов.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ на дисбактериоз готовится 5 рабочих дней.
Бактериологическое исследование мочи
Моча собирается в специальную стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов. При циститах берут первую порцию мочи в количестве 3-5 мл, при заболеваниях почек – среднюю порцию мочи в том же количестве. Доставить в лабораторию не позднее 2 часов после забора.
Прием анализа: пн.-пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ готовится 4 рабочих дня
Бактериологическое исследование мокроты
Утреннюю мокроту, выделившуюся во время приступа кашля, собирают в стерильную баночку. Перед откашливанием пациент чистит зубы и полощет рот кипяченой водой с целью механического удаления остатков пищи, слущенного эпителия и микрофлоры ротовой полости. Забранная мокрота доставляется в лабораторию не позднее 1,5-2 часов после забора.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123.
Анализ готовится 4 рабочих дня.
Бактериологическое исследование грудного молока
Для сбора молока на анализ:
1. Тщательно вымыть руки с мылом;
2. Тщательно вымыть грудь с мылом и обтереть чистым проглаженным полотенцем;
3. Руки и соски молочных желез протереть тампоном, смоченным 40% спиртом или водкой;
4. Осторожно открыть стерильную банку, крышку положить наружной стороной;
5. Первые капли грудного молока сцедить в полотенце, последующие – в стерильную баночку;
6. Плотно закрыть крышку, упаковать в пакет и доставить в лабораторию не позднее 1,5-2 часов после забора.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ готовится 3-4 рабочих дня.
Подготовка к сдаче мазка из зева
Мазок из зева забирается до утреннего туалета полости рта (до чистки зубов и полоскания ротовой полости) и натощак или через 2 часа после еды
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ готовится 4-6 рабочих дня.
ПОДГОТОВКА К ДУОДЕНАЛЬНОМУ ЗОНДИРОВАНИЮ
3а 2-3 дня до исследования исключить из пищи картофель, бобовые, цельное молоко, черный хлеб, жареные блюда.
На дуоденальное зондирование необходимо подходить к 8.00 в кабинет 125
натощак (не есть, не пить, не курить).
С собой иметь полотенце.
В случае невозможности явиться на дуоденальное зондирование в назначенный день, пожалуйста, сообщите по тел. 28-99-90 или 28-99-91 (пн.–пт. 8 – 17)
Слепое зондирование (тюбажи по Демьянову)
Утром натощак выпить 1 стакан минеральной воды комнатной температуры без газа, затем лечь на правый бок, приложить к области печени теплую грелку. Лежать 40-60 мин.
МЕТОДЫ СБОРА МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЙ:
Осуществлять взятие клинического материала, строго следуя инструкции, только стерильными одноразовыми инструментами в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры. Работать в одноразовых перчатках.
КРОВЬ ДЛЯ ПЦР
Забор крови производят натощак или через 3 часа после приема пищи из локтевой вены одноразовой иглой (диаметр 0,8-1,1мм) в специальную вакуумную систему типа «Vacuett» (сиреневые крышки – 6% ЭДТА). После взятия крови пробирку следует плавно несколько раз перевернуть вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом. Гепарин в качестве антикоагулянта использовать нельзя!
Условия хранения:
при температуре 20-25˚С – в течение 6 часов с момента взятия;
при температуре 2-8˚С – не более 1 суток.
Недопустимо замораживание образцов цельной крови!
МОЧА ДЛЯ ПЦР
Следует забирать первую порцию утренней мочи в количестве 20-30 мл в специальный сухой стерильный контейнер на 60 мл.
Условия хранения:
при комнатной температуре – в течение 6 часов;
при температуре 2-8˚С – в течение 1 суток.
Допускается однократное замораживание-оттаивание материала
МАЗКИ ИЗ РОТОГЛОТКИ ДЛЯ ПЦР
Мазки берут сухими стерильными ватными тампонами на пластиковой основе вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки. После взятия материала тампон помещают в стерильную одноразовую пробирку со специальной транспортной средой и аккуратно обламывают пластиковый стержень на расстоянии не более 0,5 см от рабочей части, оставляя рабочую часть зонда с материалом в транспортной среде. Пробирку плотно закрывают крышкой.
Условия хранения и перевозки материала:
при комнатной температуре – в течение 6 ч.;
при температуре от 2 до 8˚С – в течение 3 суток;
при температуре минус 20˚С – в течение 1 месяца;
при температуре минус 70˚С – длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.
ФЕКАЛИИ ДЛЯ ПЦР
Фекалии следует забирать из предварительно продезинфицированного горшка или подкладного судна. Небольшое количество забирать из нескольких мест одноразовой лопаточкой прикрепленной к крышке стерильного контейнера, в который забирают материал.
Условия хранения:
при комнатной температуре – в течение 6 часов;
при температуре 2-8˚С – в течение 3 суток;
при необходимости хранения более 3 суток – при температуре не выше -16˚С.
Комплексное выявление возбудителей острых кишечных инфекций в одном образце фекалий: одновременное выявление и дифференциация ДНК (РНК) микроорганизмов рода Шигелла (Shigella spp.) и энтероинвазивных E. coli (EIEC), Сальмонелла (Salmonella spp.) и термофильных Кампилобактерий (Campylobacter spp.), аденовирусов группы F (Adenovirus F) и ротавирусов группы А (Rotavirus A), норовирусов 2 генотипа (Norovirus 2 генотип) и астровирусов (Astrovirus))
Материал для исследования – фекалии
Забор: в специальный стерильный контейнер,
собрать кал из продезинфицированного судна одноразовой лопаточкой на крышке контейнера, доставить в течение 6 ч
Ожидание результата 7-10 дней
СОСКОБЫ (МАЗКИ) СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА ДЛЯ ПЦР
Забор материала осуществляют с помощью специальных стерильных одноразовых инструментов – урогенитальных зондов, цитощеток.
1. Для получения соскоба эпителия из цервикального канала удалить слизь с поверхности шейки матки стерильным тампоном, ввести рабочую часть цитощетки в цервикальный канал и сделать два полных оборота по часовой и против часовой стрелки. Извлечь зонд, избегая касания стенок влагалища, и поместить его в пробирку с транспортной средой. Рабочую часть цитощетки обломить в области насечки и оставить в пробирке.
2. Для получения вагинального отделяемого провести по поверхности эпителия заднее-нижнего свода влагалища, вращая зонд и перенести зонд в пробирку с транспортной средой. Рабочую часть зонда обломить в области насечки и оставить в пробирке. Пробирку плотно закрыть крышкой.
3. Перед взятием соскоба из уретры необходимо обработать наружное отверстие уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. Ввести рабочую часть зонда в уретру, несколькими вращательными движениями собрать отделяемое и перенести зонд в пробирку с транспортной средой. Рабочую часть зонда обломить и оставить в пробирке.
Для скрининговогоисследования материал из разных локализаций можно помещать в одну пробирку с транспортной средой. Для диагностики воспалительных заболеваний материал с каждой локализации следует забирать в отдельную пробирку.
Условия хранения:
при комнатной температуре в течение 48 часов;
при температуре 2-8˚С в течение 2 недель.
