- Что и как отбирают на исследование?[1]
- Образцы должны быть собраны в течение 3-х суток после появления клинических признаков заболевания.
- От одного больного необходимо отобрать не менее 3-х видов клинического материала.
- Забор клинического материала проводят в специальных СИЗ.
- При выполнении аэрозольных процедур использовать СИЗ.
- Привлекать для сбора образцов минимум лиц.
- Утилизировать медотходы.
- Аналог пцр — тест на антиген
- Важно!
- Особенности забора биоматериала
- Показания к проведению исследования
- Правила забора проб клинического материала для пцр-тестирования на covid–19 » гу «минский областной центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья»
- Принцип проведения пцр-диагностики на ковид-19
- Сертификация
- Специфика анализа рнк sars-cov-2 (ковид, covid-19)
- Специфика анализа рнк sars-cov-2 (ковид, covid-19) (cito)
Что и как отбирают на исследование?[1]
От больных или контактных лиц для проведения лабораторной диагностики отбираются:
1. Респираторный материал:
• Мазки из носоглотки и ротоглотки. Мазок из носоглотки и ротоглотки забирают в стерильные пластиковые пробирки Эппендорфа и тампоны для мазков (швабы) (рис. 1).
Носоглоточные и орофарингеальные тампоны помещают в одну пробирку для увеличения вирусной нагрузки (рис. 2).
• Мокрота (при наличии). Отбирается в стерильный контейнер, для транспортировки используют транспортную среду, содержащую противогрибковые и антибиотиковые добавки.
Мы рекомендуем
Узнайте номер телефона вирусологической лаборатории, в которую будет доставляться материал, и уточните, можно ли вместо транспортной среды использовать 0,5 мл физраствора. Требования НИИ «Вектор» — только транспортная вирусологические среда. Физраствор разрешают использовать только для исследований в местном ФБУЗ.
• Эндотрахеальный аспират. Отбирают в стерильный контейнер.
• Бронхоальвеолярный лаваж. Забирается в стерильный контейнер, возможно небольшое разведение образца. Ткани биопсии или аутопсии, включая легкие, забираются в стерильный контейнер с физиологическим раствором и транспортной средой, содержащей противогрибковые и антибиотиковые добавки.
• Биопсия легких. Ткани биопсии или аутопсии, включая легкие, забираются в стерильный контейнер с физиологическим раствором и транспортной средой, содержащей противогрибковые и антибиотиковые добавки. Для посмертной диагностики используют аутоптаты легких, трахей и селезенки.
2. Сыворотка крови. Забираются в пробирки для разделения сыворотки, у взрослых собирают 3–5 мл цельной крови.
Проводят две пробы:
• первую — в острую фазу, в первую неделю болезни;
• вторую — через 2–4 недели после острой фазы.
Анализ образцов сыворотки, отобранных в острый период и в период реконвалесценции, может поддержать идентификацию истинного агента.
3. Цельная кровь. Собирается в пробирку. Цель — обнаружить антиген, особенно в первую неделю болезни.
4. Моча. Собирается в контейнер для сбора мочи.
Образцы должны быть собраны в течение 3-х суток после появления клинических признаков заболевания.
Важно правильно выбрать время забора клинического материала. Предположительно наиболее высокое содержание вируса в дыхательных путях человека может быть в течение первых 4-х дней после появления признаков заболевания.
От одного больного необходимо отобрать не менее 3-х видов клинического материала.
Например, при тяжелом случае это бронхоальвеолярный лаваж, эндотрахеальный аспират, мокрота или кровь.
Один экземпляр проб направляется в референс-центр НИИ «Вектор».
Важно!
От каждого пациента забирают 3 вида клинических материалов в двух экземплярах , т.е. минимум 6[2] проб.
Один экземпляр проб отправляется в лабораторию ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии», второй — в референс–центр ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора (р. п. Кольцово Новосибирской обл.).
Забор клинического материала проводят в специальных СИЗ.
Все образцы, собранные для лабораторных исследований, являются потенциально инфекционными. Поэтому медицинский персонал при сборе и транспортировании клинического материала должен соблюдать требования биологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты — шапочку, респиратор, очки, противочумной халат или противочумной костюм (рис. 3, 4).
При выполнении аэрозольных процедур использовать СИЗ.
При выполнении аэрозольных процедур (аспирация или открытое отсасывание образцов дыхательных путей, интубация, сердечно-легочная реанимация, бронхоскопия) необходимо применять:
• респираторы типа FPP 2 (например, «Исток-1Ф FFP2», «3М 9925 FPP 2» и т. п.) или эквивалент (рис. 5). Более высокий уровень защиты — пневмошлем (например, пневмошлем «ЛИЗ-4» и т. п.);
• очки для защиты глаз или защитный экран (рис. 6);
• противочумной халат и перчатки, водонепроницаемый фартук (при проведении процедур, при которых жидкость может попасть на халат) или специальные защитные комплекты (рис. 7).
Привлекать для сбора образцов минимум лиц.
Ограничить число лиц, присутствующих в комнате, до минимума, необходимого для сбора образцов, использовать СИЗ.
Утилизировать медотходы.
Все используемые материалы должны быть утилизированы в соответствии как медотходы класса В[3].
Аналог пцр — тест на антиген
Экспресс-тест NowCheck COVID-19 AG – набор исследований для максимально быстрой и простой диагностики новой коронавирусной инфекции. Тест позволяет выявить антигены COVID-19 в слизи из носоглотки методом ИХА (иммунохроматографии). По точности и достоверности он приближен к анализу ПЦР, но в отличие от него не требует специальных условий и оборудования.
Тест зарегистрирован в реестре медицинских изделий и имеет медицинское регистрационное удостоверение РФ. Метод, который лежит в основе исследования, получил одобрение Министерства здравоохранения России.
Диагностика занимает в среднем 15-30 минут, что позволяет максимально быстро заподозрить коронавирусную инфекцию и принять решение о госпитализации.
Важно!
Информацию из данного раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. В случае боли или иного обострения заболевания диагностические исследования должен назначать только лечащий врач. Для постановки диагноза и правильного назначения лечения следует обращаться к Вашему лечащему врачу.
Особенности забора биоматериала
Процесс забора биоматериала – важнейший этап в ПЦР-диагностике. Крайне важно получить чистый образец, ведь от этого зависит точность и результативность исследования. К счастью, для проведения ПЦР-тестов на Ковид процесс взятия мазка из носоглотки и ротоглотки предельно прост и не требует предварительной подготовки со стороны пациента:
- пациенту необходимо прийти в клинику (по предварительной записи или для записи на удобное время) Лучше это сделать в утреннее время до 11 часов;
- вас проводят в манипуляционный кабинет, где квалифицированный специалист проводит забор биоматериала;
- медработник, используя специальную стерильную манипулу, соберет отделяемое со слизистой в области неба и внутренних стенок полости носа;
- затем манипула запечатывается в герметичный контейнер и отправляется в лабораторию для последующего исследования биоматериала;
- результаты диагностики будут готовы в течение 1 суток.
Показания к проведению исследования
ПЦР-диагностика коронавируса с предельно высокой на сегодняшний день точностью позволяет получить ответ на конкретный вопрос – болеет ли человек коронавирусом в данным момент. Это исследование не позволяет узнать, переболели вы ранее или нет.
Таким образом, учитывая текущие карантинные меры во многих странах, данный метод диагностики особенно актуален для людей, которые собираются поехать за границу или возвращаются домой.
В таких реалиях показаниями к проведению ПЦР теста являются:
- наличие симптомов простудных заболеваний (в целях подтверждения или опровержения заболеваемости коронавирусом);
- в случае контакта с больным в течение последних 14 дней;
- возвращение домой после пребывания в стране с высоким риском заражения (чтобы избежать обсервации и карантинных мер);
- если вы собираетесь выехать заграницу (результат предъявляется при пересечении границу и по приезду, чтобы избежать обсервации и подтвердить свою безопасность для окружающих);
- в целях подтверждения того, что пациент, заболевший коронавирусом, выздоровел.
Правила забора проб клинического материала для пцр-тестирования на covid–19 » гу «минский областной центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья»
Важным условием получения достоверного результата исследования методом ПЦР на COVID–19 является правильный забор, хранение и своевременная доставка клинического материала в лабораторию.
Входными воротами для вируса SARS-CoV-2 являются верхние дыхательные пути. После попадания на слизистые носоглотки и ротоглотки вирус начинает размножаться в эпителиальных клетках. Поэтому в конце инкубационного периода и в первые дни клинических проявлений наиболее информативными являются мазки именно из этих областей.
Все процедуры по забору клинического материала выполняет медработник с использованием средств индивидуальной защиты.
ЗАБОР МАТЕРИАЛА
- Мазки берут двумя сухими стерильными зондами. Для этого используют пластиковые зонды с синтетическим тампоном. Нельзя пользоваться зондом на деревянной основе с хлопковым тампоном, так как его применение может ингибировать реакцию и привести к ложноотрицательным результатам.
- Первый зонд вводят поочередно в обе полости носа пациента на глубину 2 см. Затем его направляют слегка вниз и вводят его в нижний носовой ход, прижимают наружную стенку носа и вращательным движением тщательно снимают слущенный эпителий. Вторым зондом берут мазок с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, не касаясь корня языка.
- Мазок из носоглотки и мазок из ротоглотки помещают в одну пробирку с транспортной средой для большей концентрации вируса.
- Свободные концы зондов отламывают и герметично закрывают пробирку.
Взятый материал в течение 1-4 часов доставляют в лабораторию с соблюдением холодовой цепи. Допускается хранение биологического материала в течение 24 ч при температуре 2–8°С, более длительно – при температуре не выше минус 20° С. При нарушении сроков хранения и условий транспортировки генетический материал возбудителя может разрушаться, что приведет к ложноотрицательным результатам.
Достоверность результата ПЦР-теста зависит не только от соблюдения правил забора, но и от правильной подготовки к сдаче мазков со стороны пациента:
- мазок необходимо сдавать натощак или не ранее чем через 3 часа после последнего приёма воды и пищи;
- за 3 часа до взятия мазка нельзя курить, чистить зубы, использовать спрей-освежитель для ротовой полости или жевательную резинку;
- не менее чем за 3 часа до взятия мазка нельзя использовать лекарственные средства местного применения (капли, спреи, мази, рассасывающиеся таблетки, леденцы или пастилки).
Что будет, если есть или пить перед сдачей мазков для ПЦР-теста?
Коронавирус SARS-Cov-2 живет внутри эпителиальных клеток. Для ПЦР-исследования важно получить мазок с достаточным количеством инфицированных клеток. В момент проглатывания еды эпителиальные клетки механически слущиваются пищевым комком с поверхности слизистой оболочки. Если взять мазок сразу после еды, в пробирку может попасть недостаточное количество инфицированных клеток. В этом случае пациент может получить ложноотрицательный результат. То же касается питья. Вода смывает с поверхности миндалин, задней стенки глотки инфицированные клетки.
Можно ли пользоваться лекарственными средствами для носа и горла (капли, спреи, антисептики) перед сдачей мазков?
Перед взятием мазков нельзя использовать лекарственные средства для местного применения (капли, спреи и др). После их применения количество вируса на слизистой снижается и увеличивается вероятность получения ложноотрицательных результатов ПЦР-теста.
Почему нельзя чистить зубы перед сдачей ПЦР-теста?
Применение любых очищающих средств для полости рта снижает количество вируса в получаемом мазке. Зубная паста может содержать антисептические компоненты. Попадание ее остатков в пробирку с мазком может ингибировать реакцию, что приведет к недостоверным результатам.
О.А. Колесникова, биолог лаборатории вирусологических исследований и диагностики ВИЧ/СПИД
Принцип проведения пцр-диагностики на ковид-19
ПЦР или полимеразная цепная реакция – современный метод лабораторных исследований, который позволяет с предельной точностью выявлять различные инфекции в организме человека, включая Ковид-19. Результаты анализа максимально точны, исключается даже вариант ложноположительного теста.
Суть метода заключается в обнаружении молекул РНК вируса во взятом биологическом материале. В отношении диагностики коронавируса исследуемым биоматериалом становится мазок слизистой ротоглотки и носоглотки.
Особое внимание при этом уделяется именно РНК SARS-CoV-2, то есть рибонуклеиновой кислоте, являющейся носителем генетической информации вируса. Но даже если при первом исследовании РНК вируса не выявлены, подозрения все же могут оставаться (что не связано с возможной погрешностью).
Как известно, инкубационный период в случае Ковид-19 составляет 14 дней, по этой причине полностью исключить болезнь удается после проведения повторной диагностики. При этом все же стоит отметить главное преимущество ПЦР-тестов – это один из самых точных и чувствительных методов диагностики инфекционных заболеваний.
Сертификация
Лаборатория, проводящая данное исследование обладает всеми необходимыми сертификатами для проведения ПЦР-диагностики на COVID-19 (коронавирус). Лабораторные исследования проводятся согласно международным стандартам на современном диагностическом оборудовании.
Заключение о проведенном исследовании выдается пациенту на специальном бланке с печатями, подтверждающими действительность документа.
Специфика анализа рнк sars-cov-2 (ковид, covid-19)
Анализ на РНК SARS-CoV-2 (КОВИД, COVID-19) можно назвать стандартный ПЦР-тест на коронавирус. В данном случае выполнение исследования занимает 1 день с момента забора биоматериала. В случае положительного результата исследования человек считается инфицированным.
Специфика анализа рнк sars-cov-2 (ковид, covid-19) (cito)
РНК SARS-CoV-2 (КОВИД, COVID-19) (CITO) – схожее по принципу забора биоматериала и методу проведения исследование. Разница заключается лишь в скорости, припиской «CITO» обозначается экспресс-тест, который, в отличие от стандартного метода исследования, проводится в течение нескольких часов.