Toxoplasma gondii, днк [реал-тайм пцр]
Молекулярно-генетическое исследование, направленное на выявление активной токсоплазменной инфекции.
Синонимы русские
Токсоплазма гондии, возбудитель токсоплазмоза.
Синонимы английские
Toxoplasmosis, DNA, Toxoplasma gondii Molecular Detection by PCR, T. gondii quantitative real-time PCR.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Амниотическую жидкость, биоптат, венозную кровь, капиллярную кровь, ликвор.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Токсоплазма гондии – это одноклеточный паразитарный микроорганизм, который обнаруживается в земле и в организме некоторых животных и способен вызывать инфекционное заболевание токсоплазмоз.
Токсоплазма очень распространена во всем мире. Инфицированность населения в некоторых странах составляет 95 %. Данный паразит способен поражать млекопитающих, грызунов и птиц. Это одна из так называемых TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских названий токсоплазмы, краснухи, цитомегаловируса, герпеса), являющихся опасными для плода.
Путь инфицирования токсоплазмами обычно пероральный. Микроорганизм попадает в организм человека с водой и едой, зараженной паразитами, особенно с сырым или недостаточно термически обработанным мясом. Так как частым переносчиком инфекции являются кошки, заражение возможно при уборке кошачьего туалета инфицированного животного и несоблюдении личной гигиены. Вероятен трансплацентарный путь передачи инфекции – от матери к ребенку. Человек также может заразиться при переливании крови и пересадке донорских органов.
Жизненный цикл микроорганизма проходит со сменой хозяев. Домашний кот, как окончательный хозяин, заражается при поедании грызунов и птиц. В кишечнике котов токсоплазма делится и формирует ооцисты. При активной инфекции миллионы микроскопических ооцист в течение нескольких недель выделяются с кошачьими экскрементами. Ооцисты становятся заразными через 2-3 дня и сохраняют жизнеспособность несколько месяцев. В организме других хозяев, в том числе и людей, токсоплазмы проходят ограниченный период жизненного цикла и формируют неактивные цисты в мышцах, головном мозге и глазах. Иммунная система хозяина способна сохранять цисты в покоящемся состоянии и защищать организм от развития инфекции. Стадия покоя может длиться всю жизнь, пока не возникнет иммунодефицит. У большинства здоровых людей попадание токсоплазмы в их организм может пройти бессимптомно или под видом легкой простуды. Токсоплазменная инфекция играет роль в развитии таких психических заболеваний, как шизофрения, психозы. При токсоплазменном поражении органов зрения возникает хориоретинит.
Впервые возникшая или реактивированная токсоплазменная инфекция может протекать тяжело и вызывать осложнения у пациентов с ослабленной иммунной системой: пациентов с ВИЧ, первичными иммунодефицитами, больных, получающих химиотерапию или иммуносупрессивную терапию после трансплантации органов.
Признаки токсоплазмоза: длительная лихорадка, головная боль, увеличение лимфатических узлов, боль в мышцах, увеличение печени, гепатиты. Внутриутробное инфицирование приводит к слепоте, энцефаломиелиту, задержке роста и даже к гибели новорождённых. У пациентов с иммунодефицитами инфекция вызывает менингит и энцефалит (воспаление головного мозга с нарушением сознания, головной болью, лихорадкой). Ранняя диагностика играет решающую роль в эффективности лечения. Избавиться от паразита при хронической инфекции очень трудно.
При инфицировании во время беременности риск передачи токсоплазмы плоду составляет 30-40 %. Заражение в ранние сроки приводит к выкидышу, мертворождению или серьезным неврологическим нарушениям у новорождённого. У большинства детей, инфицированных в поздние сроки беременности, симптомы токсоплазмоза проявляются только через несколько лет после рождения: потеря слуха, серьезные проблемы с глазами и неврологический дефицит.
Существует несколько способов выявления токсоплазмоза. Выбор методики и материала зависит от клинической картины заболевания. Чтобы обнаружить первичную или вторичную токсоплазменную инфекцию и определить ее активность, измеряют уровень антител IgМ и IgG в сыворотке (серологический метод) и распознают ДНК микроорганизма (ПЦР). Молекулярно-генетический метод обладает высокой чувствительностью и видоспецифичностью – при активной инфекции ДНК токсоплазм можно определить с большой точностью.
Присутствие ДНК т. гондии в крови и моче свидетельствует об активном инфекционном процессе.
Для чего используется исследование?
- Чтобы определить активность токсоплазменной инфекции у беременных и у пациентов с иммунодефицитами.
- Чтобы оценить риск заражения плода при беременности.
- Для дифференциальной диагностики заболеваний, протекающих с лихорадкой, энцефалитом и поражением органов зрения.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на токсоплазмозменную инфекцию (симптомы: лихорадка, головная боль, неврологические нарушения, тяжелые инфекционные поражения органов зрения) или ее носительство и при наличии факторов риска заразиться токсоплазмозом.
- При подозрении на токсоплазмоз у беременных и пациентов с патологией иммунной системы.
- При планировании беременности в целях профилактики заражения плода.
- При положительных результатах теста на антитела к токсоплазме.
- При обследовании детей, родившихся от матерей с токсоплазмозом.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Причины положительного результата
- Активная форма токсоплазмоза – острая инфекция.
Причины отрицательного результата
- Отсутствие токсоплазм в организме.
- Латентная (неактивная) токсоплазменная инфекция – покоящиеся цисты в тканях.
- Недостаточное количество ДНК микроорганизма в биоматериале.
Важные замечания
Для выявления первичного заражения или хронизации инфекционного процесса необходимо комплексное обследование с учетом уровня специфических IgG и IgM. Результаты ПЦР-диагностики являются основным критерием активности токсоплазменной инфекции, но не могут подтвердить отсутствие токсоплазм в организме.
Также рекомендуется
Кто назначает исследование?
Акушер-гинеколог, инфекционист, невропатолог, офтальмолог.
Литература
- Fuentes I, Rodriguez M, Domingo CJ, del Castillo F, Juncosa T, Alvar J. Urine sample used for congenital toxoplasmosis diagnosis by PCR. J Clin Microbiol. 1996 Oct; 34(10):2368-71. PMID: 8880481.
- Gilles R. G. Monif. Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology. 5th edition. The Pantenon Publishing Group. NY, USA, 2003: 1044 pp.
- Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 2607.
- Manal S E Mahmoud. Detection of Toxoplasma gondii antigens in urine by reverse latex agglutination test during human toxoplasmosis. Journal of the Egyptian Society of Parasitology (2002). Volume: 32, Issue: 2, Pages: 429-446. PubMed: 12214921.
Профилактика
Учитывая вышесказанное, женщине при планировании или наступлении беременности чрезвычайно важно пройти все назначенные обследования, ни в коем случае не игнорируя какие бы то ни было анализы и процедуры. Если обнаружено отсутствие иммунитета к токсоплазме, или же имеет место выраженный иммунодефицит, необходимо принимать все меры предосторожности, особенно при наличии в доме кошки: животное не должно гулять на улице и питаться сырым мясом.
Санитарную обработку туалетного лотка следует производить регулярно, и лучше бы к нему не прикасаться человеку, для которого токсоплазма представляет опасность. Кошку желательно обследовать в ветеринарной клинике и, если выявлен паразитоз, качественно пролечить.
Возможно, наилучшим решением является, – как бы тяжело это ни было для большинства семей, – расстаться с домашним питомцем, по крайней мере временно, на период вынашивания беременности.Овощи и фрукты необходимо тщательно отмывать; любые мясные продукты должны проходить достаточную термическую обработку, а столы и доски, на которых разделывается мясо, – очищаться с применением моющих средств.
В заключение отметим, что мир простейших микроорганизмов по-прежнему находится в фокусе напряженного внимания исследователей, – в том числе фармакологов, – однако многие вопросы остаются неясными. Это касается и токсоплазмы, которое свое название получила отнюдь не случайно: вырабатываемый ею токсин необычен и может оказаться гораздо опасней, чем принято считать в настоящее время.
Известно и доказано, в частности, что это вещество каким-то образом искажает баланс нейромедиаторов и, если концентрация его в организме высока, влияет на поведение носителя (например, определенные виды птиц именно по этой причине, а не из-за токсоплазмоза как такового, поставлены под угрозу вымирания).
Кроме того, изучается серьезно обоснованная гипотеза о том, что токсоплазма играет патогенетическую роль в возникновении и развитии душевных болезней человека, – прежде всего, исследуется возможная связь между токсоплазмой и шизофренией. Для психиатрии такие исследования чрезвычайно важны, поскольку шизофрения, – эта «жестокая королева» психических заболеваний, – как тяжелый хронический эндогенный процесс за последние сто лет досконально изучена в клинических проявлениях, однако до сих пор совершенно непонятна в триггерных и патогенетических механизмах, и ежегодно наносит колоссальный социальный, психологический и экономический ущерб в масштабах всей цивилизации.
Токсоплазма гондии: инфекция у плода
Риск инфицирования плода резко возрастает со сроком гестации на время сероконверсии. Риск трансмиссии по результатам статистических исследований составляет 15% при сероконверсии матери на сроке 13 недель, 44% — на 26 неделях, и 71% — на 36 неделях. Хотя эти исследования основаны на группах из получавших лечение женщин, вероятно, с их помощью можно оценить риски и у не пролечившихся женщин, так как доказательств эффективности получаемой терапии для снижения риска трансмиссии токсоплазмы гондии от матери к плоду, до сих пор не получено.
Иммунокомпетентные женщины, зараженные до беременности, не заражают плод, хотя отмечены редкие исключения. Женщины с иммунодефицитом могут страдать паразитемией в течение беременности, несмотря на то, что заражение произошло до беременности. У таких женщин имеется риск внутриутробного заражения плода.
Врожденная токсоплазма гондии является довольно редким явлением; его случаи были зафиксированы у шести женщин в течении последних 30 лет. Один документально зафиксированный случай демонстрирует, что предшествовавший иммунитет к токоплазме не защитил от реинфекции атипичным штаммом.
Последствия для плода. Для диагностики возможно использования УЗИ, однако, УЗ-признаки поражения плода неспецифичны. Наиболее характерные признаки — гиперэхогенные внутричерепные очаги или кальцификаты, расширение желудочков мозга – являются показателями неблагоприятного прогноза.
Расширение желудочков мозга как правило происходит симметрично с обоих сторон. В одном из 32 подтвержденных случаев, развитие дилатации происходило очень быстро, в течении нескольких дней. В европейских исследованиях ненормальные сонографические признаки внутричерепных кальцификатов и расширения желудочков были найдены в 7% случаев (14 из 218 зараженных плодов).
Однако, как было отмечено в других исследованиях, такие поражения повлялись только после 21 недели гестации. Ненормальные участки, поражающие другие органы (например, асцит) менее специфичны для токсоплазмы. Увеличенная толщина и плотность плаценты, асцит, уплотнение печени, реже – перикардиальные и плевральные выпоты так же обнаруживались. Повторное УЗИ может быть рекомендовано при рассмотрении варианта прерывания беременности на поздних сроках.
Микроцефалия и ЗВРП как правило, не характерны для врожденного токсоплазмоза. Редким осложнением также является выкидыш. В европейских когортных исследованиях 1208 инфицированных женщин риск выкидыша в первом триместре, выявленный у 448 женщин, был не выше подобного риска у контрольной группы.